因業(yè)務(wù)調(diào)整，部分個(gè)人測試暫不接受委托，望見諒。

檢測項(xiàng)目

細(xì)胞存活率、增殖抑制率、線粒體脫氫酶活性、半數(shù)抑制濃度(IC50)、劑量-效應(yīng)關(guān)系曲線、時(shí)間依賴性毒性效應(yīng)、膜完整性評(píng)估、乳酸脫氫酶(LDH)泄漏量、活性氧(ROS)生成水平、谷胱甘肽(GSH)消耗量、線粒體膜電位變化、ATP合成效率、細(xì)胞周期阻滯分析、凋亡率測定、壞死率計(jì)算、炎癥因子(IL-6/TNF-α)釋放量、DNA損傷標(biāo)志物(γ-H2AX)、自噬小體形成率、溶酶體膜通透性、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平、鈣離子穩(wěn)態(tài)失衡度、細(xì)胞遷移抑制率、吞噬功能異常度、基因表達(dá)譜變化(如p53/Bax/Bcl-2)、蛋白質(zhì)合成抑制率、代謝組學(xué)異常指標(biāo)、納米顆粒胞內(nèi)定位分析、表面電荷依賴性毒性差異、粒徑相關(guān)性毒效評(píng)估、長期亞慢性毒性累積效應(yīng)

檢測范圍

金屬氧化物納米顆粒(二氧化鈦、氧化鋅、氧化鐵)、貴金屬納米顆粒(金納米粒、銀納米粒)、碳基納米材料(碳納米管、石墨烯量子點(diǎn))、半導(dǎo)體量子點(diǎn)(碲化鎘、硒化鉛)、聚合物納米顆粒(PLGA微粒、聚乳酸微球)、脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)(阿霉素脂質(zhì)體)、樹枝狀大分子載體(PAMAM)、介孔二氧化硅納米粒(MCM-41)、磁性納米復(fù)合物(Fe3O4@SiO2)、金屬有機(jī)框架材料(MOFs)、納米羥基磷灰石骨修復(fù)材料、納米氧化鈰抗氧化劑、納米氧化銅抗菌劑、納米氧化鋁磨料微粒、碳包覆金屬核殼結(jié)構(gòu)材料(C@Fe)、量子點(diǎn)熒光探針(CdSe/ZnS)、納米氧化鎂阻燃劑、納米氧化鎳催化劑載體、納米氧化釔穩(wěn)定劑、聚苯乙烯熒光微球標(biāo)準(zhǔn)品(PMS)、黑磷烯二維材料(BPNS)、鈣鈦礦納米晶(CsPbBr3)、氮化硼納米片(BNNS)、硫化鉬納米片(MoS2)、纖維素納米晶須(CNC)、殼聚糖基藥物緩釋微粒(Gem-CTNPs)、普魯士藍(lán)納米解毒劑(PBNPs)、上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料(NaYF4:Yb,Er)、金屬硫蛋白修飾納米金簇(AuNCs@MT)

檢測方法

1.MTS比色法：基于水溶性四唑鹽在活細(xì)胞線粒體脫氫酶作用下轉(zhuǎn)化為甲臜染料，通過酶標(biāo)儀測定490nm吸光度值定量細(xì)胞活性。需優(yōu)化接種密度(通常510~110?cells/well)和反應(yīng)時(shí)間(1-4小時(shí))，注意避免納米材料自身吸光干擾2.CCK-8法：采用WST-8底物產(chǎn)生水溶性甲臜染料，適用于高密度接種或長期培養(yǎng)體系3.LDH釋放法：通過測定培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶活性評(píng)價(jià)膜完整性損傷程度4.臺(tái)盼藍(lán)染色法：直接計(jì)數(shù)拒染活細(xì)胞比例驗(yàn)證MTS結(jié)果可靠性5.流式細(xì)胞術(shù)：結(jié)合AnnexinV-FITC/PI雙染區(qū)分凋亡與壞死群體6.JC-1探針法：通過紅綠熒光比值變化定量線粒體膜電位去極化程度7.DCFH-DA熒光探針：檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基累積水平8.彗星電泳：單細(xì)胞水平評(píng)估DNA鏈斷裂損傷程度9.WesternBlotting：分析凋亡相關(guān)蛋白(caspase-3/PARP)表達(dá)水平10.透射電鏡(TEM)：觀察納米顆粒胞內(nèi)分布及超微結(jié)構(gòu)改變

檢測標(biāo)準(zhǔn)

GB/T16886.5-2017醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第5部分：體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)ISO10993-5:2009醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)-體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)ASTME2525-08(2018)納米材料體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)指南OECDTG487體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)USP<87>體外生物反應(yīng)性試驗(yàn)JJF1714-2018納米材料生物效應(yīng)檢測方法驗(yàn)證規(guī)范GB/T36082-2018納米技術(shù)納米材料毒理學(xué)篩查用體外試驗(yàn)規(guī)范ISO/TR10993-55:2019醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)-第55部分：納米材料降解產(chǎn)物表征GB/Z39262-2020納米技術(shù)體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞毒性試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)指南ASTME2526-22使用三維細(xì)胞培養(yǎng)模型評(píng)估納米材料毒性的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)踐

檢測儀器

1.多功能酶標(biāo)儀(SpectraMaxi3x)：配備490nm濾光片模塊實(shí)現(xiàn)甲臜染料精確定量2.CO?培養(yǎng)箱(ThermoHeracellVIOS)：維持37℃/5%CO?環(huán)境完成細(xì)胞-納米顆粒共培養(yǎng)3.流式細(xì)胞儀(BDFACSCelesta)：配置488nm/640nm雙激光器實(shí)現(xiàn)多參數(shù)凋亡分析4.激光共聚焦顯微鏡(LeicaTCSSP8)：通過Z軸層掃觀察納米顆粒亞細(xì)胞定位5.超高效液相色譜(WatersACQUITYUPLC)：定量分析培養(yǎng)基中炎癥因子濃度6.RT-PCR儀(ABIQuantStudio7)：檢測毒性相關(guān)基因表達(dá)變化7.X射線光電子能譜(ThermoESCALABXi+)：表征納米顆粒表面化學(xué)狀態(tài)改變8.Zeta電位分析儀(MalvernZetasizerNanoZS)：測定納米懸液穩(wěn)定性參數(shù)9.電感耦合等離子體質(zhì)譜(Agilent7900ICP-MS)：定量金屬離子溶出濃度10.全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(NexcelomCellometerX4)：快速獲取活細(xì)胞密度數(shù)據(jù)

檢測流程

1、咨詢：提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認(rèn)檢測用途及項(xiàng)目要求

3、填寫檢測申請(qǐng)表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品，安排費(fèi)用后進(jìn)行樣品檢測

6、檢測出相關(guān)數(shù)據(jù)，編寫報(bào)告草件，確認(rèn)信息是否無誤

7、確認(rèn)完畢后出具報(bào)告正式件

8、寄送報(bào)告原件