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檢測領(lǐng)域:

成分分析,配方還原,食品檢測,藥品檢測,化妝品檢測,環(huán)境檢測,性能檢測,耐熱性檢測,安全性能檢測,水質(zhì)檢測,氣體檢測,工業(yè)問題診斷,未知成分分析,塑料檢測,橡膠檢測,金屬元素檢測,礦石檢測,有毒有害檢測,土壤檢測,msds報告編寫等。

實時熒光PCRCt值檢測

發(fā)布時間:2025-07-29

關(guān)鍵詞:實時熒光PCRCt值測試儀器,實時熒光PCRCt值測試案例,實時熒光PCRCt值測試范圍

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來源:北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所

文章簡介:

實時熒光PCR Ct值檢測是分子生物學(xué)領(lǐng)域的核心技術(shù),用于定量目標(biāo)核酸序列的初始濃度。Ct值通過測量熒光信號達到預(yù)設(shè)閾值的循環(huán)數(shù)實現(xiàn),檢測要點包括閾值設(shè)定、擴增效率評估和特異性驗證,確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
點擊咨詢

因業(yè)務(wù)調(diào)整,部分個人測試暫不接受委托,望見諒。

檢測項目

Ct值測定:定量目標(biāo)核酸初始濃度,檢測參數(shù)包括循環(huán)數(shù)范圍(10-45)、閾值設(shè)定精度(±0.5循環(huán))。

擴增效率評估:分析PCR反應(yīng)效率,檢測參數(shù)包括斜率(-3.1至-3.6)、R平方值(≥0.98)。

熔解曲線分析:驗證擴增產(chǎn)物的特異性,檢測參數(shù)包括熔解溫度范圍(70-95°C)、峰寬(±0.5°C)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn):用于目標(biāo)濃度定量,檢測參數(shù)包括線性范圍(10^2-10^8copies/μL)、截距精度(±0.5)。

檢出限檢測:確定檢測靈敏度,檢測參數(shù)包括最低檢測濃度(1copy/μL)、置信區(qū)間(95%)。

精密度測試:評估重復(fù)測量變異,檢測參數(shù)包括變異系數(shù)(≤5%)。

特異性測試:檢查非特異擴增,檢測參數(shù)包括熔解曲線一致度、無模板控制陰性結(jié)果。

抑制測試:檢測樣本中抑制物,檢測參數(shù)包括內(nèi)控基因Ct值偏差(≤1.0循環(huán))。

試劑性能驗證:評估試劑盒性能,檢測參數(shù)包括批次間一致性(Ct值差≤0.8)。

樣本類型驗證:針對不同樣本優(yōu)化,檢測參數(shù)包括提取效率(≥90%)。

動態(tài)范圍評估:分析檢測線性區(qū)間,檢測參數(shù)包括動態(tài)范圍寬度(6logs)。

交叉污染檢查:監(jiān)控實驗室污染,檢測參數(shù)包括空白對照陰性率(100%)。

檢測范圍

臨床診斷樣本:病原體檢測如病毒、細菌核酸分析。

食品安全樣本:食品中轉(zhuǎn)基因成分或污染物篩查。

環(huán)境監(jiān)測樣本:水、土壤中微生物核酸定量。

法醫(yī)分析樣本:DNA指紋圖譜鑒定。

藥物開發(fā)樣本:基因表達水平評估。

獸醫(yī)診斷樣本:動物病原體檢測。

農(nóng)業(yè)生物技術(shù)樣本:作物基因型分析。

個性化醫(yī)療樣本:癌癥標(biāo)志物檢測。

科研實驗樣本:基因編輯效率驗證。

工業(yè)應(yīng)用樣本:生物制劑質(zhì)量控制。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

ISO20395生物技術(shù)核酸定量實時PCR法。

GB/T34796分子生物學(xué)檢測通用要求。

ASTME2888實時PCR檢測指南。

GB/T38505實時熒光PCR檢測方法。

ISO22174食品安全分子檢測通則。

GB/T37871病原體核酸擴增檢測。

ISO17822-2臨床分子診斷要求。

GB/T35992轉(zhuǎn)基因成分PCR檢測。

檢測儀器

實時熒光PCR系統(tǒng):用于PCR擴增和熒光信號監(jiān)測,功能包括Ct值計算和曲線分析。

微量分光光度計:測量核酸濃度和純度,功能包括樣本定量和質(zhì)量控制。

離心機:分離樣本組分,功能包括細胞沉淀和雜質(zhì)去除。

恒溫混勻器:均勻混合反應(yīng)試劑,功能包括試劑孵育和均質(zhì)化。

生物安全柜:提供無菌操作環(huán)境,功能包括防止PCR污染。

微量移液器:精確轉(zhuǎn)移微小體積液體,功能包括樣本和試劑加樣。

檢測流程

1、咨詢:提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認(rèn)檢測用途及項目要求

3、填寫檢測申請表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品,安排費用后進行樣品檢測

6、檢測出相關(guān)數(shù)據(jù),編寫報告草件,確認(rèn)信息是否無誤

7、確認(rèn)完畢后出具報告正式件

8、寄送報告原件

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